我们在使用细胞摇瓶培养HEK293细胞时，肉眼观察不到结团，但是在细胞计数仪上会观察到细胞有几个黏连，似葡萄状相连的现象。在出现这种现象时我们注意以下几点：

第一，使用细胞摇瓶换液时动作要轻。

第二，293细胞在低代时容易贴壁，生长良好，在传到几十代以后，易聚集成团，且贴壁不牢，用PBS冲洗时即可能脱落，即使消化后也不容易吹打成单细胞悬液。

第三，刚复苏的293贴壁很慢，复苏接种后24小时内,应尽量减少观察细胞次数或不作观察,以免因晃动而影响细胞贴壁。复苏后48小时左右观察贴壁情况并进行首次更换培养基比较合适。

当然也有可能是消化过渡引起细胞损伤，释放引起聚团的组物质。

1、消化得时候尽量温和些；

2、细胞离心速度不宜过大或时间过长；

3、传代得时候保证吹打均匀。

这就是我们在使用细胞摇瓶培养HEK293细胞时，肉眼观察不到结团，但是在细胞计数仪上会观察到细胞有几个黏连，似葡萄状相连的现象。在出现这种现象时我们注意的几点方法了。