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细胞转瓶在狂犬疫苗制备中的应用
发表日期:2021-06-07

狂犬病是狂犬病毒所致的急性传染病,人兽共患,病毒主要通过破损的皮肤或黏膜侵入人体,人患狂犬病后的病死率接近100%。当前对于狂犬病尚无有效治疗手段,主要以注射狂犬疫苗预防为主。在狂犬疫苗制备中,细胞转瓶是一种常用的培养容器。


细胞转瓶

2L细胞转瓶

狂犬疫苗分为灭活疫苗、减毒活疫苗和基因疫苗,疫苗的研发是一个漫长而复杂的过程,且成本较高,狂犬疫苗也经历了漫长的发展历程,从1882年,巴斯德将牛脑中提取的狂犬病毒株,并在兔脑内连续传90代,成为固定毒,到90年代,引进Vero细胞疫苗。狂犬疫苗也随着各项技术的提高在不断完善,其中,利用细胞转瓶制备狂犬疫苗的操作方法如下:
1、将冻存的Vero细胞进行细胞复苏,然后使用滚瓶机进行贴壁细胞培养。在37℃进行传代培养,完成后收获细胞。 


细胞培养瓶
细胞培养瓶


2、将病毒接种到vero细胞,并继续传代培养,并同时检查是否有染菌和外源因子。
3、将病毒悬液进行离心浓缩。
4、灭活病毒后再次离心浓缩后,进行低温保存
5、将多份收获的病毒进行解冻并合并,经过离心纯化用缓冲液稀释并用0.45μm过滤后,低温保存。
6、将疫苗分装后,冻干保存。


细胞工厂
细胞工厂


       细胞转瓶使用时需要借助滚瓶机一起使用,除了应用于狂犬疫苗的制备外,还应用于动植物细胞、细菌、病毒等的培养,具有操作简单、成本低,利于掌控等特点,是大规模细胞培养前的一个过度阶段。

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