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细胞培养瓶对巨噬细胞RAW264.7的应用
发表日期:2022-09-07

我们在使用细胞培养瓶培养时由于RAW 264.7细胞可以作为很多基础医学领域和药理学领域的研究模型,所以每个人的研究方向不同,所以细胞培养方式也有差别,今天富道细胞来跟大家说一下我们对该细胞的一些小心得。

由于该细胞生长快,条件好时24h内能分裂两次至少。而且喜欢扎堆,所以2天就要传代,不是真的空间不够,而是细胞都挤在一起。所以,如果细胞培养瓶里细胞密度小,培养基2天还是很好,可是细胞却扎堆,需要进行传代了,就会造成培养基的浪费,所有我们可以保持瓶中的细胞密度在20~40%左右,分裂2~3次就传代,这时刚好培养基发黄。细胞太少就浪费培养基了。

细胞培养瓶对巨噬细胞RAW264.7的应用_富道细胞

这个细胞是巨噬细胞,就是M0,未分化的巨噬细胞,外观是圆形高折光,贴壁非常快,10min内能贴80%,也容易脱落,无胰酶拍打200下或者胰酶室温30s轻轻拍打都能下来60~80%,不过无胰酶吹打是吹不下来的。

如果培养条件不好,它会分化,变成多边形,从高折光的小圆亮点变成灰色的一小片,变得粘附非常紧,所以我觉得应该控制消化时间和拍打力度,不要过分追求把所有细胞都弄下来,这样一来影响状态好的未分化圆形细胞活力,另一方面会把状态不好的分化细胞弄下来,不如缩短胰酶时间到1min内,把分化过的高粘附细胞留在瓶里,正好起到对细胞分化状态的选择作用。

我们进行传代时首先无胰酶拍打,能弄下来约50%的细胞,然后加胰酶拍打30s,镜下观察,一般30s刚刚好,剩下未脱落的都是分化的形态不好的细胞,这种细胞继续培养,如果要回到圆形,可以用胰酶消化后传代。

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