让细胞更好地贴壁是保证其后期正常生长的关键,有时候我们会遇到细胞培养瓶内的细胞不好贴壁的情况,通过以下方法可以更好地促进细胞贴壁生长。
1、提高接种密度:细胞主要是通过自身分泌的细胞外基质来贴附在支持物表面生长,如果细胞贴壁情况不好可能是接种数目太少,无法分泌足够的细胞外基质,可以通过增加接种密度来提高贴壁效果。
2、增加贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养体系中由于缺少这种成分,细胞的贴壁效果会下降很多。可以适当添加一些血清来促进细胞贴壁。
3、提高接种细胞质量:细胞本身的状态也会影响其贴壁效果,在接种前确认细胞状态良好,不要选用已经老化的细胞。
4、选用TC处理的耗材:细胞培养瓶是贴壁细胞培养常用的耗材,这种耗材分为TC处理和非TC处理表面两种类型,在选择耗材的时候要选择经过TC处理的产品,这样的产品在表面引入了亲水团,更利于细胞贴壁生长。
此外,细胞贴壁不良也有可能是引入了其他污染源,如细菌、真菌、支原体等,操作人员要注意严格执行无菌操作规程,避免污染细胞。
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