我们在使用细胞培养瓶进行细胞培养过程中,细胞周围包括细胞上有很多小黑点,我们应该采取什么措施呢?
首先我们知道细胞培养瓶中有很多小黑点一般可以判定为细胞碎片、杂质、黑胶虫污染,如果判定为细胞碎片或杂质那我们可以根据悬浮培养和贴壁培养进行已下处理方式:细胞培养瓶进行悬浮细胞过程中出现杂质的情况首先收集细胞上清慢速离心(500~600 rpm/min,5~6 min)并更换新的细胞培养瓶。
贴壁细胞出现这种情况的时候我们将细胞用 PBS 洗 2~3 遍,洗的时候,轻轻拍打培养瓶,让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落,再弃去 PBS,消化时先加低浓度的胰酶如 0.05% 胰酶消化 1 min 左右,让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来,去掉低浓度胰酶,然后正常消化细胞,将收集的细胞悬液慢速离心(500~600 rpm/min,5~6 min)并更换新的培养瓶,并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。
如果怀疑黑点是支原体污染,可进行支原体检测,检测阳性请及时将细胞处理后丢弃。比较珍贵的细胞,可以尝试使用支原体清除剂(如泰乐菌素等)去除,并与其他细胞分开培养
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