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冬虫夏草的液体发酵可以用细胞摇瓶进行
发表日期:2022-07-08

冬虫夏草是一种药学价值很高的中药,由于生长周期比较长,自然繁殖的虫草不足以满足市场的需求,于是不少人对虫草的人工栽培进行探索,利用细胞摇瓶和发酵罐进行虫草菌丝体的液体发酵是目前应用比较多的一种方法。

(1) 固体细胞摇瓶菌种培养:将分离纯化的菌种接种于50毫升摇瓶培养基中,放入19°C培养箱,培养20天,待菌丝长满三角瓶并产孢即可。

(2)液体摇瓶种子培养:在500毫升瓶中装入200毫升培养基,高压灭菌30分钟,冷却至室温后将经分散后的2瓶固体瓶菌种接种到500毫升三角瓶培养基上,并置于恒温振荡培养箱,温度19℃±1X:,180转/分条件下培养,培养时间为10~ 12天。

(3)—级种子罐:在50L气升式发酵罐中装入21L液体培养基,pH值为6.0~7.0,并加人0.03%食用消泡剂。高压灭菌后冷却至20℃,将4瓶上述培养好的500毫升摇瓶种子接入培养。培养温度为19~20℃,通气量为1 : 0.5升(升•分钟),保压 (4.903~7.0845)\104帕。经7天通气培养,达到对数生长期后即中止,最终培养体积为30升。

冬虫夏草的液体发酵可以用细胞摇瓶进行

(4)二级种子罐:在500升种子罐中装人300L液体培养基, pH值为6.0~7.0,并加人0.03%食用消泡剂,高压灭菌后冷却 至20°C,将一级种子罐的30升液体种子全部接人二级种子罐培养,培养温度19~20℃,通气量为1 : 0.5升(升·分钟),保压 (4.903~7.0845)乂104帕。经过7天通气培养,达到对数生长期后即中止,培养体积为300升。

(5)发酵罐:在5吨发酵罐中装入3吨液体培养基,pH值为 6.0~7.0,并加入0.03%食用消泡剂,高压灭菌后冷却至20℃, 将二级种子罐培养好的液体种子300升全部接人发酵罐培养,培养温度为19~20°C,通气量为1 : 0. 4~0.5升(升•分钟),罐压(4.903~7.0845) X104帕,培养时间5天。当发酵液中出现大量小菌球,镜检发现大量菌丝,残糖在以下,发酵液较黏稠,颜色明显加深时,可中止发酵出罐。将发酵液离心,菌丝体烘干,粉碎,检测,包装,发酵滤液浓缩后除菌分装,检测,出厂。

以上是利用细胞摇瓶进行冬虫夏草液体发酵培养的具体流程,通过这种方式不仅可生产出直接利用的菌丝体和发酵液,还可为下游深加工提供大量原料。

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