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细胞摇瓶培养淋巴细胞失败的原因分析
发表日期:2022-05-29

淋巴细胞是白细胞的一种,是体积非常小的白细胞。培养这种细胞前期一般要用到细胞培养瓶中的细胞摇瓶,如果淋巴细胞培养失败,可能是以下原因:


1.污染是细胞培养失败的主要原因,包括细菌和真菌。支原体污染不易发觉,但对细胞生长影响较小,尤其只培养72 小时。一般是分离过程中的用液和培养基出现了污染。


2.pH值过高或过低,或培养过程中细胞摇瓶的瓶塞不紧,CO2 逸出,导致pH值上升。


细胞摇瓶培养淋巴细胞失败的原因分析


3.诱导剂 淋巴细胞在体内外一般是不分裂的,在培养过程中须添加刀豆球蛋白(ConA) 、脂多糖(LPS) 、白细胞介素2 ( IL - 2) 、植物血凝素(PHA) 、丝裂霉素等促分裂剂和抗原物质。须注意它们的浓度及是否失效。


4.培养器皿洗涤不干净,有蜡、油污或酸残留。


5.培养用液含有杂质,配制过程中所使用的各种溶液必须用三蒸水,若含有Fe 、Ca 等离子及杂质,可影响细胞的增殖。


6.接种的细胞数目过多或过少,或提取的淋巴细胞中混有大量红细胞。


7.血清质量不佳,影响淋巴细胞的生长。


综合来看,如果细胞培养瓶中的细胞摇瓶培养淋巴细胞失败,原因可能是多方面的,需要具体分析,找出原因,才能确保再次培养细胞时的成功率。


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