在细胞的大规模培养中,细胞工厂是常用的一种培养容器。不同于普通的培养耗材,它采用多层结构设计,具有培养面积大、占用空间少、可结合自动化设备使用等优势。如此特殊的细胞培养工具,应该如何操作呢?
1、用倾倒的方式加入需要量的细胞悬液到细胞工厂中,建议每层加入的体积为200ML。
2、加完细胞悬液后保持侧立,有加液口的一侧背向自己,平衡一段时间以使液体平均分配到各层。
3、逆时针旋转90度,使加液口一面朝上,静置一段时间,培养液便会自动平均分配到每一层中。
4、双手握住进液口的一面,慢慢将细胞工厂放倒,变为水平放置。
5、采用十字交叉法混合悬液,然后轻轻地将细胞工厂移至细胞培养箱中孵育培养。
6、培养结束后直接将培养液倒入收集容器。
7、先用PBS清洗一遍(遵循步骤2-4),加入细胞消化液(建议每层加入的消化液≥15ML/层),重复步骤2-4,静置2分钟(具体视细胞消化情况而定)。
8、加入适量消化终止液混匀,把细胞悬液倒入收集容器。
以上是细胞工厂的操作步骤,细胞培养是一项精细化的工作,在操作中要严格按照规定步骤操作,避免因为操作不当损伤细胞,影响后期实验效果。
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