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消化细胞培养瓶内细胞常用的胰蛋白酶
发表日期:2022-05-06

消化细胞是培养细胞过程中的一项基本操作,而胰蛋白酶则是消化细胞过程中用到的一种消化液。今天我们就详细讲一下胰蛋白酶。


胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种,EC 3.4.4.4,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。胰蛋白酶的作用是使细胞培养瓶内细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。


消化细胞培养瓶内细胞常用的胰蛋白酶


胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。


在使用胰蛋白酶消化细胞的过程中药注意避免消化液被细菌污染,一般消化时间约为1-3分钟,肉眼观察细胞培养瓶瓶底由半透明转为透明、点状时,弃去细胞消化液,或看见培养瓶壁呈白茫状即可。

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