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消化细胞培养瓶内细胞常用的胶原酶
发表日期:2022-05-05


细胞培养瓶在贴壁细胞培养时应用较多,当细胞密度达到一定程度时,我们就需要进行细胞的传代操作。而由于贴壁细胞是贴附在瓶底生长的,这个时候就需要用到消化酶,胶原酶是常用的一种。


胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,非常易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。


消化细胞培养瓶内细胞常用的胶原酶


胶原酶是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。


因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为浓度200U/ml(约为1mg/mL)或0.03%~0.3%。胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶,要根据细胞培养瓶内的细胞类型选择胶原酶类型。


以上是关键胶原酶的相关信息及适用的细胞类型,此外,消化细胞培养瓶内的细胞还会用到胰蛋白酶,这也是使用率比较高的一种酶。

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