细胞摇瓶是一种三角形的细胞培养容器,主要用于各种悬浮细胞、真菌的培养。在培养细胞的过程中,换液是一项基本的操作,但操作不当也会影响细胞的生长。那么,我们该如何进行换液呢?
通过换液可以去除掉细胞在生长国产中产生的代谢废物,补充新鲜的含血清培养基,为细胞的生长继续提供充足的营养物质。换液之前我们首先要准备好相应的器材:装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、废液缸等。在使用前需要将器材放入超净台进行灭菌,防止污染细胞。
灭菌完毕后,做好个人防护(灭菌服、灭菌手套、口罩),从培养箱取出细胞摇瓶,用酒精喷壶在瓶子表面喷洒酒精消毒,转移到超净台,打开盖子,轻轻洗出旧的培养液,可用移液器加入新鲜含血清培养基,动作要轻柔。加好培养基后,盖上盖子,做好标记,注明换液时间、细胞种类、操作人员等信息。
放入培养箱之前再次酒精消毒,整理操作台,用酒精擦拭超净台台面,清理废液和垃圾。
以上是细胞摇瓶的换液操作,需要注意,细胞换液要把控好时机,悬浮细胞长到达培养基中的营养成份用的差不多时,半量换液,切勿频繁换液。
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