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测试细胞工厂细胞毒性常用的五种方法
发表日期:2022-02-22

细胞毒性是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。通过这个试验可以判断细胞工厂原料中是否含有不利于细胞生长的物质。

细胞毒性是化学物质(药物)作用于细胞基本结构和/或生理过程,如细胞膜或细胞骨架结构,细胞的新陈代谢过程,细胞组分或产物的合成、降解或释放,离子调控及细胞分裂等过程,导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱,所引发的不良反应。一般检测细胞工厂是否具有细胞毒性可以通过以下方法进行:

10层细胞工厂

10层细胞工厂

1、MTT、XTT法:利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化,然后通过酶标仪进行检测;

2、LDH的方法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性;

3、其它酶方法:如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等;

40层细胞工厂

40层细胞工厂

4、细胞增殖能力分析试剂盒:正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态。

细胞摇瓶

细胞摇瓶

5、荧光素发光法细胞生存能力检测:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中,AK具有激活ADP生成ATP。当细胞受损后,细胞膜发生破损,AK会释放到培养上清中。试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光,通过化学发光仪可以定量进行检测。

检测细胞工厂是否具有细胞毒性可以通过以上几种方式进行,这项检测也是确保细胞培养耗材质量的常规检测项目之一。
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