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细胞转瓶中产生沉淀的四大原因分析
发表日期:2022-02-11

细胞转瓶是用于细胞和组织大规模培养的一次性细胞培养耗材,在培养细胞时,有时候我们会发现瓶子底部有沉淀,它除了可能与受到各种微生物污染有关外,与温度变化、浓度改变、钙盐、金属等方面也有很大关系。

2L细胞转瓶

2L细胞转瓶

1、温度变化

在细胞转瓶培养细胞时,温度是引起沉淀的主要因素之一。当遭遇温度的极端变化时,高分子量血浆蛋白会从溶液中析出;热失活和冻融循环能促进蛋白降解和沉淀;因为液体或重组成培养基在使用之间保持冷藏储存,盐可能沉淀,尤其是10x或其他浓缩的储存液。

2、失水诱导的浓度改变

如果培养基蒸发,培养基组分(包括盐) 的浓度将会增加,特别是培养基表面可能容易形成晶体沉淀。

5L细胞转瓶

5L细胞转瓶

3、钙盐

制备无血清培养基时,组分添加的顺序可能导致不可溶分子的形成。钙盐尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反应产生CaSO4晶体。高压灭菌和pH值不稳定会加剧这一问题。


PETG血清培养基瓶

4、金属补充物

铜、铁和锌等金属离子是细胞生长所必需的,是无血清培养基的重要补充物。培养系统中其他血清组分的缺失可能导致这些金属沉淀,为细胞形成有毒的环境。

在利用细胞转瓶培养细胞时要注意到以上几个因素的影响,并采取相应错误尽可能的避免沉淀的产生,确保细胞的正常生长与增殖。
注:部分内容源于merck生命科学
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