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细胞摇瓶培养灵芝对氧气和接种量的要求
发表日期:2022-01-18

细胞摇瓶是一种经济实惠的细胞培养工具,主要用于对氧气要求比较高的细胞系,如在悬浮液中培养的细菌、真菌、动植物细胞等。灵芝的液体发酵与菌种制作中也用到了这种工具,在培养时对氧气、接种量也有一定的要求。

500ml三角细胞摇瓶

500ml三角细胞摇瓶

1、氧气

深层发酵培养时,菌丝生长快,所以对氧的需要量非常高,在开始11~18小时内,若发酵液中氧含量不能满足灵芝菌丝生长的需要,将会严重影响细胞摇瓶中菌丝的生长。但在发酵初期,发酵液中菌丝量少,所以需氧量也可少些,菌丝进入旺盛生长期时,需要的氧量就增加,这时发酵罐通气量应控制到约0.51(v/v min),即每1m³的发酵液中,每分钟应通入无菌纯净空气约0.51m³。发酵后期,菌丝衰老,代谢能力下降,呼吸量也降低,所以通气量可适当减少。通气发酵培养时,要不断的搅拌,搅拌能使氧气均匀的分布在发酵液中,通过搅拌,发酵液中可溶解更多的氧气,菌丝分布也均匀,但搅拌速度不能太快,搅拌速度太快菌丝容易产生损伤。

血清培养基瓶

血清培养基瓶

2、接种量

液体深层发酵培养时,菌丝生长速度与接种量有关,接种量多,菌丝生长快,杂菌感染率低,但菌丝老化快,接种量少,菌丝生长慢,菌丝老化也慢,但若在较长时间中,发酵液中没有足够的灵芝菌丝时,抗菌性就会降低,所以接种量过少时,容易感染杂菌。

细胞培养瓶

细胞培养瓶

此外,在利用细胞摇瓶进行灵芝的液体培养所用的菌种必须菌龄短、生命力旺盛、生长速度快,这样才能缩短发酵周期短,提高经济效益高,菌种生命力强,抗杂菌能力也强。菌龄老、生命力弱、生长速度慢也容易感染杂菌。
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