细胞培养瓶是贴壁细胞培养时常用的一类细胞培养耗材,贴壁细胞不同于悬浮细胞,需要贴在支持物表面才能生长。贴壁的效果直接影响细胞的生长情况,通过以下方法可以提高细胞的贴壁效果:
1、适度消化细胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
2、尽量用塑料材质的细胞培养瓶培养,这样的瓶子经过TC表面处理后,可以大大提高瓶子的贴壁性能,让细胞更好的贴附在上面。
3、复苏新的细胞,第一周用20%血清帮助细胞复原。
血清培养基瓶1000ml
4、使用合适的细胞外基质或贴壁试剂,帮助细胞更好贴壁。
5、细胞传代24小时之内,尽量不要晃动,以免影响细胞贴壁效果。
6、体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜上,因此培养在有胶原的底物上有利于生长。人或小鼠表皮细胞培养,可以用γ射线照射后的3T3细胞为饲养层,另外降低pH、Ca2+含量和温度,均有利于上皮细胞生长。
提高细胞培养瓶内细胞的贴壁效果,可以通过以上几种方式。此外,在传代接种时一定要铺均匀,避免细胞抱团生长。