细胞培养摇瓶是一种常用的细胞培养耗材,主要用于各种悬浮细胞的培养,小容量的瓶子也可以用于培养基的制备或储存。在培养CHO细胞时,就会用到这种耗材。
CHO细胞是一个转化细胞系,1957年从得到,被广泛地用来表达的蛋白。在对CHO细胞进行悬浮培养时,首先将传代培养基(CD CHO)置于室温,使其温度恢复至室温后再转入37℃ 摇床内预热30 min,再利用移液器将种子细胞液从冻存管内吸出打入装有预热培养基的细胞培养摇瓶内,加入适量培养液,开始培养。细胞复苏过程要注意无菌操作,溶解冻存细胞时速度一定要快,避免缓慢升温细胞内形成冰晶,对细胞造成损伤。
在细胞培养摇瓶内培养2-3天后,细胞密度增高,营养物质逐渐耗尽,需要对细胞进行扩培。根据细胞密度计算扩培体积,当达到反应器扩培接种细胞数量后,停止培养,接种至反应器进行扩培。
装有培养基10层细胞工厂
在利用细胞培养摇瓶进行CHO细胞的悬浮培养时,一般要借助摇床进行规律的晃动,以防止细胞堆积,影响其生长与繁殖。操作时还要注意无菌,避免因为操作不当引入细菌污染,对细胞生长造成不良影响。