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如何处理细胞培养瓶内的各种污染
发表日期:2021-10-15

细胞培养瓶是细胞培养过程中经常用到的一种细胞耗材,在培养细胞时,各种污染经常给实验造成各种困扰,阻碍实验进程。那么如何处理好这些污染呢?

细胞污染
细胞污染

细胞污染一般是由无菌操作技术不当、器皿试剂灭菌不彻底、手或器械从打开的器皿口上方经过等原因造成的。细胞一旦被污染,多数是很难挽回的,以下是细胞污染常见的几种类型及处理方法:

T75细胞培养瓶
T75细胞培养瓶

  1. 细菌污染:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显,细胞大多在24小时死亡。可在培养液中加相应的抗生素处理,如四环素、庆大霉素等,如果细胞不是特别珍贵,建议弃用。
  2. 霉菌污染:因为细胞培养瓶内的培养液是清亮的,所以霉菌污染非常难以早期发现,等发现时往往已经为时过晚了。细胞一旦被霉菌污染,很难挽救,两性霉素B或制霉菌素都于事无补,建议果断舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒。
  3. 黑胶虫污染:黑胶虫是纳米级的细菌,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去。培养液也是不浑的,一般不会太影响。但是如果太多了,也会影响细胞生长和实验结果。可以通过增加细胞接种密度的方式,提高细胞生存率。
  4. 支原体污染:支原体在倒置显微镜下不可见。早期污染,培养液也不浑浊。支原体污染后,可影响所有的细胞生长参数。如发现这种污染建议扔掉细胞,重新进行实验。


以上是细胞培养瓶常见的几种污染及处理办法,细胞污染要以预防为主,做好培养间,器皿和培养液的消毒灭菌工作。在操作的时候,严格执行无菌操作规范。

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