培养基是细胞培养过程中必需的营养物质,在利用细胞工厂进行细胞培养时通常会涉及到换液操作,这样可以清除细胞在生长过程中产生的代谢废物,补充新鲜的培养基,使细胞更好的生长与繁殖。
更换细胞工厂中的培养基首先要准备好所需的器材:装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、液体转移盖、转移管、废液缸等。然后将所有器材放入超净台,打开紫外照射灭菌,如果培养的细胞对温度比较敏感,可以将含血清的培养基瓶子放入37℃的水浴箱,使得培养基温度在37℃,再转移到超净台紫外灭菌,细胞培养间也需要紫外照射半小时左右。
紫外照射灭菌后,操作人员穿好灭菌服,戴好灭菌手套和口罩,取出细胞工厂,用酒精喷壶在表面喷洒75%酒精消毒,并将其转移到超净台,打开盖子,连接液体转移盖和转移管,导出培养液。加入新鲜含血清培养基,注意一定不要从细胞贴壁面加入,应从侧壁加,动作轻柔,以免冲落细胞。加好培养基后,盖上盖子,在耗材表面做标记,注明换液时间、细胞种类、操作人员等信息。在放入培养箱之前应再次用酒精喷洒表面,整理操作台,用酒精擦拭超净台台面,清理废液和垃圾。
T75细胞培养瓶
细胞对环境比较敏感,在对细胞工厂内的培养基进行换液操作时,一定要注意无菌操作,避免因换液过程中感染各种细菌而影响细胞生长。
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