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细胞培养板内的细胞不均匀怎么办
发表日期:2021-08-23


细胞培养板是小规模细胞培养的主要培养耗材,在使用时我们经常会遇到细胞聚集、分布不均匀的现象,遇到这种情况该如何解决呢?

96孔细胞培养板

遇到细胞培养板内的细胞分布不均问题,首先看细胞是如何混匀的,是滴管吹打还是振荡培养板,如果是后者,而且是转圈摇匀的话,很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分,导致细胞中间少四周多。可以在培养种板之前,将培养板放入培养箱里进行几个小时的饱和后再取出,接种细胞时力量要轻,可以采用滴头在板孔的侧面慢慢加入,让细胞悬液流入板孔,这样培养的细胞基本是均匀生长。切忌使用振荡器振荡,否则细胞就会聚积在一起。

细胞培养方瓶

T175细胞培养瓶

培养板孔直径愈小,细胞不均现象越明显,24、96孔板这种现象比较多,因为液体的附壁使得孔内培养液不是成一个液平面,而使用这两种孔板由于需要加干预等原因而不能加足量培养液,使得细胞随培养液一起出现“边集”现象,如果为了使孔中央也有均匀细胞而增加接种细胞数量的话,需要观察何种指标,如果是MTT,免疫组化的话会因为细胞成层而影响结果。


细胞工厂

消化细胞时要注意吹打均匀,避免细胞成团,而且细胞培养板孔内的培养液量要足够,一般接种时加足量培养液,加干预时换一次液,干预液加培养液量等于接种时培养液量,这样的话“边集”现象会有所改观。

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