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96孔板出现“边缘效应”的原因分析
发表日期:2021-08-10

96孔板是ELISA实验中常用的一种细胞检测耗材,在实验中我们经常会遇到“边缘效应”,影响细胞的生长状态,出现这种情况的原因是什么呢?


96孔板出现“边缘效应”的原因分析


  “边缘效应”是指在利用96孔板进行细胞培养时,细胞在孔板中的位置会影响细胞的生长状态,尤其是处在周边及四个角的孔中细胞通常会表现出分布不均的现象,该现象在酶联免疫反应中尤为常见,表现为96孔板外周孔显色较中心孔深。出现“边缘效应”的原因主要有两方面:



96孔板出现“边缘效应”的原因分析


    1. 温度效应:经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因。孔板的聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。
    2. 蒸发效应:虽然通常细胞培养箱中都会放置一盘双蒸水以维持培养箱中的湿度,但仍难达到多孔板中的湿度,特别是在培养箱经常开关的情况更是如此。由于位置效应,边缘孔的湿度较中间孔更低,水分挥发的现象就更为严重。这样就容易造成四周培养基的体积会明显少于中间孔,而四个角落的孔尤为严重。


细胞培养耗材

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    以上是造成96孔板在实验时出现边缘效应的原因分析,一般可以通过使用防挥发盖或放弃周边孔的方式来处理。

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