细胞传代是细胞培养中的常见操作,是指将细胞从一个培养容器转移到新的培养容器,以促使细胞继续增殖和生长。下面是细胞工厂中细胞传代操作的一般步骤:
1.准备细胞培养物:取出细胞培养物,并检查细胞的状态和密度。确保细胞培养物在最佳生长状态下,并评估细胞数量和健康程度。
2.预处理培养容器:选择适当规格的细胞工厂,根据细胞数量和预计生长时间,添加适量的培养基或培养液。
3.润洗细胞:将细胞培养物中的细胞用培养液润洗,去除细胞培养物中的残留物和废液。通常使用无菌的缓冲液如PBS(磷酸盐缓冲液)或无菌的细胞培养基进行润洗。
4.细胞解离:加入适当的细胞解离酶、酶胺或温和的缓冲液来解离细胞,以使其分散成单个细胞。时间和条件应根据具体细胞类型和解离试剂进行优化。
5.计数细胞:使用细胞计数仪或倒数器,对解离的细胞进行计数,以确定细胞的浓度和数量。根据需要计算和调整细胞的传代比例。
6.接种新的培养容器:将适量的细胞加入预处理好的新细胞工厂中继续培养。
以上是细胞工厂中细胞传代的操作步骤,在操作的时候我们要严格地遵循无菌原则,因为细胞很容易因为操作不当而受到污染。当然,你也可以借助细胞工厂专用的管路系统,降低细胞污染风险。
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