培养细胞的时候出现污染是我们最不愿意看到的事,因为细胞一旦被污染,多数是很难处理的。如果我们发现细胞工厂中的细胞被污染了,该怎么办呢?
首先,如果被污染的细胞价值不大,建议丢弃,在寻找原因后对操作室进行彻底的消毒,复苏或重新购置细胞再培养。如果细胞价值较大,又难以重新得到,可以采取以下几种办法清除:
1、使用抗生素:抗生素对杀灭细菌较有效,联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再用药效果好。预防用药一般用双抗生素,污染后清除用药需采用大于常用量5~10倍的冲洗法,于加药后作用24~48小时,再换常规培养液。此法在污染早期有效。
2、用MRA处理细胞工厂中的细胞,每4天换一次液,连续处理15天以确保细胞纯洁健康,效果好。
3、先用药物处理后,再将污染的组织培养物放在41℃培养18小时,可杀死支原体,但对细胞有不良影响。
4、使用支原体特异性血清:用5%的兔支原体免疫血清可去除支原体污染,因特异抗体可抑制支原体生长,故经抗血清处理后11天即转为阴性,并且5个月后仍为阴性。但此法比较麻烦,不如用抗生素方便、经济。
总的来说,一般细胞工厂中的细胞被污染处理起来是非常繁琐的,且不保证处理效果。所以建议我们在操作的时候还是要严格执行无菌操作,以预防为主。
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