96孔酶标板是一种配合在酶标仪上,用来做酶联免疫实验的器材,是酶联免疫反应实验中的重要载体工具。在使用时需要按照既定的步骤进行,一般情况,使用方法如下:
1、加样品:将标本稀释液加到包被板内,将需要检测的血清用PBS或生理盐水按照1:20的比例稀释后取10ul加入到96孔酶标板的反应孔内。
96孔酶标板
2、加对照:加入阴性对照3孔,阳性对照1孔,还有100ul的对照血清。
3、进行温育:将反应板震荡,使样品充分的混匀,置于37℃的温箱或者水浴反应20分钟的时间。
4、洗板:用蒸馏水将洗涤液15ml稀释至300ml的体积。手洗的时候应该将反应板孔内的容物倾出,将洗涤液注满反应孔的位置,然后放置30秒钟后用力甩去,这样的动作重复5次后开始拍干。机洗需要进行5次,每孔注入洗涤液200ul或者可以注满,然后停留30秒钟后吸尽拍干。
5、加酶标工作液:在每孔内加入100ul的酶标工作液,放置到37℃的温箱中,反应20分钟后洗板5次,洗板的操作和上述步骤4是相同的。
6、这是反应的最后一步,就是显色和终止反应:将底物50ul加到反应孔内,37℃条件下避光显色10分钟的时间。在每孔内加入终止液50ul混匀用以终止反应。
96孔酶标版的使用需要在无菌的条件下进行,因此在使用前需要进行消毒,但需要注意的是有的酶标板在消毒之前需要认真的阅读说明书,看是否可以进行高温消毒。
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