在细胞培养实验中,对于细节的把控至关重要,任何的疏忽都有可能对结果产生影响,尤其是在使用细胞工厂这样的多层培养容器时。今天我们就来讲讲,细胞工厂在培养时需要注意的小细节。
细胞培养注意事项
1、所有操作必须严格按照无菌操作的要求进行。
2、提前预热∶培养容器越大,要达到设定的培养温度越长,所以在实验开始前,将细胞工厂和培养基预热至培养温度,可加快细胞贴壁,并显著提高细胞回收率。
3、请缓慢操作,避免大幅晃动产生气泡。气泡可能导致培养基从上层流到下层,导致培养基分配不均匀。
4、避免酒精或消毒液喷洒到透气盖上,酒精或消毒液可能会湿润疏水滤膜,导致不能透气影响气体交换或导致操作时不能平衡压力。
细胞工厂收获时注意事项
1、弃去培养液后使用无钙无镁磷酸盐缓冲液(CMF-PBS)清洗细胞工厂(40~50 mL/层),若有需要重复清洗一次,确保将残留的培养液清洗干净。
2、加入消化液平均分布到每层(10~40 mL/层),轻轻前后左右倾斜细胞工厂,确保消化液完全浸过培养面,细胞出现间隙时,弃去消化液,轻轻拍击细胞工厂帮助细胞从生长面脱离。
3、细胞工厂采用多层结构设计,由于不能清晰观察中间层的细胞消化状态,建议参照完全相同培养条件下的培养瓶或单层细胞工厂的消化状态,或使用专用的多层细胞培养器观察台来观察每层细胞的生长状态。
4、若细胞悬液收集完成后细胞工厂培养层存在大量细胞,则需要清洗多次或调整细胞消化的操作。
5、培养温度及CO2浓度的偏差可能影响到细胞的收获率,需密切关注培养过程中的温度和CO2浓度设定值是否满足需求。
这就是富道细胞跟大家分享的细胞工厂培养细胞时的注意事项,注意以上这些小细节让你的细胞培养实验事半功倍富道专注高端生物耗材的研发、生产与销售。
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