在利用细胞培养瓶培养细胞的时候,我们经常要涉及到换液操作,其实就是去掉旧的培养液,换入新鲜的培养液,那么换液的具体步骤是怎样的,我们需要注意什么呢?
1.操作尽量往里。尽量伸进去超净工作台一点,因为越是接近工作台边缘,细菌飘进的机会就增加,哪怕是有无菌风。
2.装培养液的瓶子和装胰酶的试管打开塞子前要用酒精擦,火上烤干再打开。开口后,最好开口向操作者倾斜放在架子上。这样你吸取液体的时候就不用一只手拿着瓶子(试管)了。
3.永远不能在开口正上方操作。吸取液体时,培养液瓶或胰酶试管开口保持倾斜,移液管也是倾斜插入瓶内。如果开口就垂直向上,你也必须垂直插入移液管,那么手上或吸耳球上就有可能有一两个细菌垂直掉进瓶内。还有,取器材时,手要“绕弯”避免在瓶子开口上方空中经过。
4.吸放最好一次完成。比如吸掉旧的培养液时最好一次吸完。如果液体比较多,要分几次吸时,移液管口不能接触废液缸。吸取新鲜培养液到细胞培养瓶时,管口不要接触瓶子,要在瓶口吹进去。因为如果接触到瓶子,管口就可能带有细胞,如果再放到培养液瓶里面去继续吸的话,培养液就会被细胞污染。当然,吸够新鲜培养液后还要吹打,这时就可以接触,只要你不再吸培养液的话。
5.移液管要套上一个吸耳球,套球时要注意,左手拿管,右手拿球套上去。关键是左手拿管的位置。不能拿管口部分,应该尽量靠上。
6.一般移液管使用前要在酒精灯上烤一下,就是所谓“过火”。但切记不能烤得太烫,稍微过一下就行了。
以上是细胞培养瓶培养细胞时的换液步骤及注意事项,你学会了吗?
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