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细胞工厂培养细胞时的内部影响因素
发表日期:2023-01-23

我们在使用细胞工厂培养细胞时细胞生长状态受各种因素的影响,这些因素看似不起眼,若不注意就会导致细胞负伤惨重。那么,在使用细胞工厂时的小细节究竟如何影响细胞生长,在使用细胞工厂培养细胞时我们又该如何避坑呢?

1.细胞之间的 接触程度

正常细胞(二倍体)存在贴壁接触抑制,长满后细胞生长停止,而肿瘤细胞等非正常细胞,接触抑制作用较弱,可生长至较高的细胞密度,但某些细胞过度生长,其损伤难以逆转,所以培养细胞时不建议细胞密度太高。

划重点:一般使用细胞工厂培养细胞细胞汇合度达到70-80%即可传代,切忌长得太满。

细胞工厂培养细胞时的内部影响因素_富道细胞

2.细胞生长 附着物

贴壁细胞在正常情况下都会贴壁,但一些细胞本身贴壁不牢或贴壁性差,这个时候包被附着物能够促进细胞的黏附,所以在培养一些特殊细胞时,需要对细胞工厂进行包被后使用。常用的基质有多聚赖氨酸(D型、L型)、明胶、胶原蛋白、细胞外基质混合物,培养时可根据需要自行选择。

划重点:细胞工厂内细胞贴壁差时可使用基质包被细胞工厂。

3.培养基的pH值

大多数细胞系在细胞工厂培养时在pH7.4左右时生长最好,而常规培养基的指示剂为酚红,所以多数情况下,我们所见的培养基都呈红色,但不同培养基的颜色会有差异,例如DMEM比1640颜色深一点。在培养细胞时,也可以根据细胞工厂内培养基的颜色判断细胞状态,如随着细胞生长,培养基颜色会变浅变黄。

划重点:培养细胞时关注培养基颜色变化,发现异常及时处理。

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