细胞非常容易受到外界环境的影响，从而出现不贴壁、空泡化等情况，因此我们在使用细胞培养瓶培养细胞时应该严格遵守无菌操作的原则：

1.实验前，请始终用70%乙醇或适合的消毒液擦拭双手和工作区。

2.将细胞培养瓶等实验所用器具放入细胞培养通风橱之前，先用70%乙醇擦拭其外部。

3.不要直接从细胞培养瓶中倾倒培养基和试剂。

4.使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时，每只移液管只能使用一次，以避免交叉污染。无菌移液管到使用时才能打开其包装。移液管应存放在工作区内。

5.培养瓶使用后应盖上盖子，以防止微生物和悬浮污染物进入。

6.涉及到的实验器具等到使用时才能打开盖子，不得将其开放暴露在环境中。使用后，应立即盖好盖子。

7.盖子取下后，必须开口朝下放置在工作台面上。

8.必须使用无菌的器皿和其他设备。

9.尽可能快速地进行实验，以降低污染风险。

以上是细胞培养瓶培养细胞时的无菌操作要点，也是细胞培养实验时需要重点注意的问题。