细胞溶血是指由于渗透压、速冻、机械力、生物或化学毒素等原因,细胞膜向外胀破导致胞质内物质流出的现象。为了避免这种情况的发生,一般要对细胞摇瓶进行溶血试验。
当体外溶液中盐浓度过低时,细胞内的渗透压高于细胞外渗透压,水分子将大量渗透进入红细胞,最终导致红细胞胀破,血红蛋白泄露,形成血红蛋白溶液,即发生溶血。在溶血过程中破裂的红细胞并不会完全失去正常红细胞的形态,有研究表明低渗导致的血红蛋白泄露是由红细胞表面形成的孔道造成的,某些等渗溶液由于细胞膜对不同种溶质通透性不同也可能发生溶血。
细胞摇瓶的溶血试验参照ISO10993-4:2017:医疗器械生物学评价第四部分:与血液相互作用试验选择;GB/T 16886.4-2003医疗器械生物学评价——第四部分:与血液相互作用试验选择。供试品、阴性对照和阳性对照与新鲜的兔抗凝血接触,使用紫外可见分光光度计在545mm波长处测定吸光度,计算供试品的溶血率,不得超过5%。
通过溶血试验可以测试细胞摇瓶是否含有可浸出的化合物,会导致体外血红细胞溶血,以避免因为培养容器不合格影响细胞培养进程。
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