在培养细胞时,细胞耗材是一种不可或缺的工具,并且一些耗材不止用于培养细胞,还是一种储存容器。细胞摇瓶就是一种多功能性的耗材,它也用于培养基的制备,其制备流程如下:
1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
2、淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3、调PH:用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。
4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。
5、分装:一般培养基放在细胞摇瓶中灭菌使用。
6、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
7、摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
8、贮存:培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
培养基为细胞生长提供各种营养物质,不同细胞对培养基的成分要求也不同。储存在三角细胞摇瓶中的培养基要注意时间及储存环境的要求,避免污染。
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